【曲线特点】：

【类型一】某标本内标无S型扩增曲线。

【类型二】外源性内标呈离散型曲线。

【原因分析】：

a) 标本采样欠佳，没有刮取到足够的鼻咽部细胞。

b) 标本保存不当，核酸降解。

c) 标本加错位置或漏加。

d) 提取失败：裂解液未混匀（外源性内标）、提取仪故障等。

e) 扩增失败：漏加反应液、模板加错孔位、混入抑制扩增反应的干扰物等。

【解决方案】：

a) 重新采集样本。

b) 送检标本及时检测，室温放置不超过4h。

c) 按照规范化流程进行相关操作。

d) 定期对在岗人员进行操作考核。

【注】内标扩增曲线异常，则该批或相应标本结果无效，需重新采样或重新检测。

02 基线设定不当的异常扩增曲线

【曲线特点】：

软件默认基线设定的扩增曲线呈波浪型，导致Ct值偏大，可能会被误判为阴性。

【原因分析】：

软件默认基线设定不准确造成扩增曲线异常。

【解决方案】：

根据检测试剂的要求设定适宜的基线。

03 软件优化造成的异常扩增曲线

【曲线特点】：

软件优化后扩增曲线向斜上方抬起，导致Ct减小，根据优化后扩增曲线会误判为阳性，但原始信号未有明显扩增。

【原因分析】：

根据设定基线，软件在自动优化扩增曲线时会放大微小异常信号。

【解决方案】：

查看原始曲线，对基线稍作调整。

【注】自动优化软件会放大微小的异常信号，可根据原始曲线判断信号真假。

04 多个标本单靶标通道翘尾

【曲线特点】：

多个标本出现单靶标通道的扩增曲线翘尾。

【原因分析】：

a) 反应液配制后保存不当，如荧光探针断裂。

b) 存在阳性质控污染或者其他荧光物质污染。

c) 扩增试剂/耗材的批间差异导致非特异性扩增增加（如试剂更新后Mg2+浓度过高）。

【解决方案】：

a) 按照说明书要求保存配制的扩增反应液。

b) 提取得到的核酸应及时进行后续处理，否则及时封盖，避免混入阳性质控或其他干扰物；实验室每天按时清洁消毒以消除潜在的干扰因素。

c) 试剂/耗材批号更换前应进行比对实验验证。

05 靶标通道呈低平S型曲线

【曲线特点】：

标本靶标通道呈低平且非典型S型扩增曲线，标本与弱阳性质控的荧光强度存在显著差异。

【原因分析】：

a) 标本存在干扰物质。

b) 提取纯化不完全。

【解决方案】：

标本重新检测，必要时可使用不同的检测试剂进行确认。

【注】对疑似标本建议使用不同的检测试剂进行确认。在异常扩增曲线判断时，应根据整批标本的扩增情况（弱阳性质控扩增曲线）综合判断。

06 蒸发引起的异常扩增曲线

【曲线特点】：

反应体系蒸发，终体积减少，荧光强度产生变化导致阴性扩增曲线整体呈斜向上或山域型。

【原因分析】：

a) 在扩增过程中因热盖导致管盖爆裂/光学膜破裂。

b) 未盖紧管盖/刮紧光学膜。

c) 未使用配套/质量合格的耗材。

【解决方案】：

a) 定期检查扩增仪状态，确保热盖温度正常。

b) 上机前盖紧管盖/刮紧光学膜。

c) 使用厂商推荐的合格扩增耗材。

d) 调整基线可适当纠正蒸发引起的异常信号，有助于后续的扩增曲线判读。

07 气泡引起的异常扩增曲线

【曲线特点】：

扩增曲线出现剧烈或明显曲折。

【原因分析】：

反应体系内有大气泡形成折射，干扰荧光的采集。

【解决方案】：

a) 加样时减少气泡的产生，同时上机前可通过离心减少气泡。

b) 调整基线可适当纠正气泡引起的异常信号，有助于后续的扩增曲线判读。

08 锯齿形异常扩增曲线

【曲线特点】：

所有通道的扩增曲线出现锯齿状。

【原因分析】：

扩增仪电压不稳、采光或者滤光片故障。

【解决方案】：

检查扩增仪电压和光路系统，及时排除硬件故障，防止后续检测的异常结果。若扩增仪故障严重影响扩增曲线判读时应重新检测。